Le cours
2. Les méthodes d’étude de la cellule
2.3. Le microscope électronique
- va nous permettre à l'intérieur de la cellule d'étudier des objets extrêmement petits, jusqu'à l'échelle d'une macromolécule. Le microscope électronique
- va nécessiter une préparation spéciale des cellules qui est différente de celle de la microscopie optique.
- Il donne des photos en noir et blanc.
1. Le microscope électronique à transmission (MET) :
- Utilise un rayonnement électronique.
- Possède un pouvoir séparateur 40 000 fois supérieur à celui du microscope optique et deux millions de fois plus que l’œil humain, et qui est théoriquement de 2nm.
- Les microscopes électroniques nécessitent la déshydratation de l’échantillon et donc la mort des cellules et du fait du faible pouvoir pénétrant des électrons les échantillons doivent être sous forme de coupes ultra fines (< 0,1um) après inclusion dans une résine.
- L’objet fixé est bombardé d’électrons, ces derniers permettent d’obtenir une image agrandie, qui se formera sur un écran fluorescent.
* Technique de coloration négative Certaines structures échappent à la microscopie électronique, la coloration négative permet
de les mettre en évidence.
L’échantillon biologique est placé sur un film et on attend que les sels de métaux
lourds se déposent
autour de l’échantillon, qui est coincé dans une pellicule de colorant imperméable aux électrons. Il apparait
en clair sur un fond sombre. 2.
Le microscope électronique à balayage
(MEB): Consiste à balayer
un échantillon par un faisceau
d’électrons, la surface est recouverte d’un film de platine
obtenu par ombrage
métallique. Figure1 : Le microscope optique MO et le
microscope électronique ME.